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此參數對于采用負反應分析酶活性的方法甚為重要，下面以丙氨酸氨基轉移酶為例簡述設置MIN-OD的步驟，選擇一份高活性酶的混合血清，用生理鹽水稀釋，得到一組從低濃度至高濃度的丙氨酸氨基轉移酶溶液；把這一組溶液按儀器設定的程序進行測定，并打印出反應曲線；從曲線中可以發現當酶活力達到一定臨界濃度時，該臨界濃度的反應曲線在連續監測時間內成線性，但是在監測時間后成非線性，即連續監測時間的后一個讀數點正好是線性與非線性的臨界點，所以該點的吸光度是在連續監測時間內酶促反應沒有發生底物耗盡時所能達到的小吸光度。
當酶活力高于上述臨界濃度時，反應曲線在連續監測期內已不呈線性反應，有些儀器自動選擇彈性速率功能，能自動選擇反應曲線上連續監測期內仍呈線性的吸光度數據計算結果，使酶活性測定的線性范圍得以擴大，可以減少稀釋及重測次數降低成本。試劑吸光度上限下限試劑吸光度上限為正向反應用，可參考試劑盒說明書數值折算成所用比色杯的光徑。如試劑盒要求上限為，比色杯光徑cm，則試劑吸光度上限設置為。試劑吸光度下限為負向反應用，設置法同試劑吸光度上限。
每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示著該試劑的變質，此時應更換合格試劑。線性范圍試劑盒的線性范圍與試劑質量反應時試劑/樣品比有關，應實測試劑盒的線性范圍。當樣品濃度低于線性下限應增加樣品量重測，而高于線性上限則應稀釋后重測。使用任何一種方法測定某待測物時，待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結果若超過此范圍，儀器將顯示測定結果超過線性范圍的提示，多數分析儀會自動將樣品減量或增量重新測定。
校正方法儀器內的設置的校正方法一般包含二點校正多點校正非線性校正等。二點校正是指用一個濃度的標準品和一個試劑空白進行校正的方法，該法要求反應必須符合朗伯-比爾定律，即標準曲線呈直線。多點校正是多個具有濃度梯度的標準品用非線性法進行校正，適用于標準曲線呈各種曲線形式的項目，如多數的免疫濁度法。非線性校正包括對數校正指數校正量程法校正等，標準曲線呈對數或指數曲線特征的項目可選擇所對應的方法校正，量程法則是根據標準曲線上每兩點間濃度與吸光度的關系計算待測物的濃度。
微孔板式ELISA儀器均為開放式的，即適用于所有微板式ELISA試劑。ELISA檢測結果的精密度主要取決于試劑的質量。全自動ELISA儀器本身的精密度一般在%左右。應用優質試劑測定結果的精密度，定量測定可達到%以下；常用的定性測定為感染性疾病抗原抗體的檢測，精密度在%左右。管式固相酶免疫測定儀應用管式固相載體的分析儀器不多，在我國應用的有年德國推出的全自動管式分析系統和配套試劑。試劑包括用鏈霉親和素包被的聚苯乙烯管生物素結合的抗原或抗體，辣根過氧化物酶標記的抗體和顯色底物ABTS。
測定中標準曲線可使用星期，每次測定只需一點定標。測定的精密度CV在%左右。測定項目齊全，包括激素腫瘤標志心肌標志和感染性疾病的抗原抗體等。法國生產的是一種特殊形狀的管式全自動ELISA的分析儀，配套使用一個特別的“試劑條”。微粒固相酶免疫測定儀美國生產自動酶免疫分析儀應用聚苯乙烯微粒顆粒直徑μm作為固相，特異抗體或抗原包被在微粒上。次抗原抗體反應后，將反應液通過特制的玻璃纖維膜，聚苯乙烯微粒吸附在玻璃纖維膜上，液體則通過膜濾出。
以后的反應在膜上進行，用過濾方式洗滌。標記酶為堿性磷酸酶，底物為-甲基傘酮磷酸酶，反應后進行熒光測定。其后生產的作藥物測定的熒光偏振分析儀與一體多項目全自動免疫分析儀也在檢驗實驗室廣泛應用。磁微粒固相酶免疫測定儀磁微粒可用磁鐵吸引與液相分離，是免疫測定中較為理想的固相載體，較早應用磁微粒作為酶免疫測定固相的是瑞士出品的分析系統，由分光光度測讀儀磁鐵板和試劑部分組成。試劑包括抗異硫氰酸熒光素抗體，特異抗體或抗原包被的磁微粒，結合的特異抗體或抗原，堿性磷酸酶標記的特異抗體或抗原及底物酚肽磷酸酯。
其應用的抗抗體是與親和素-生物素原理相同的間接包被系統，反應模式與電化學發光免疫測定亦相似。反應在試管中進行，基本上用手工操作。反應結束后將試管架放在磁鐵板上，磁微粒被磁鐵吸引至管底，完成固相與液相的分離。酶作用后反應液呈粉紅色。發光免疫技術根據示蹤物檢測的不同而分為熒光免疫測定化學發光免疫測定及電化學發光免疫測定三大類。化學發光免疫根據標記物的不同，有化學發光免疫分析微粒子化學發光免疫分析電化學發光免疫分析化學發光酶免疫分析和生物發光免疫分析等分析方法。
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