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品質優良按需定做
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當被檢溶液混濁或存在較多的干擾物質時,測定過程中會出現光散射和非特異性光吸收,從而影響測定結果的準確性,此時可用雙波長甚至多波長測定,以提高測定結果的準確性,而在實際應用中選擇輔助波長主要用于脂血溶血黃疸的干擾。由于脂質血紅蛋白膽紅素在較寬的波長范圍內有較強的光吸收,常常同測定波長有重疊,此時測得的吸光度包含待測物質的吸光度和干擾物質的吸光度,因此必須選用合適的輔助波長來干擾物質的吸光度。輔助波長的設置原則是根據測定波長選擇輔助波長,要求干擾物質在測定波長同輔助波長有相同的吸光度。
反應方向有正向反應和負向反應兩種,反應過程中吸光度增加為正向反應,吸光度下降為負向反應。樣品量與試劑量樣品與試劑量的確定一般按照試劑說明書上的比例,并結合儀器的特性進行設置,亦可根據手工法按比例縮減或重新設計,但要考慮到檢測靈敏度線性范圍,盡可能將樣品稀釋倍數大些,以降低樣品中其他成分的影響。在樣品與試劑量的設置過程中主要應注意以下幾個方面稀釋水量,添加樣品稀釋水的是為了洗出粘附在采樣針內壁上的微量血清,減少加樣誤差,添加試劑稀釋水是為了避免試劑間的交叉污染,兩種稀釋水的量應在復溶試劑時按比例扣除。
如果采用液體試劑盒時因不再用水,無法扣除稀釋水量,所以兩種稀釋水應盡量減少,以免試劑被過量稀釋。小樣品量,即分析儀進樣針能在規定的誤差范圍內吸取的小樣品量,隨著技術的不斷改進,儀器的小樣品量逐漸減小,目前有少至μl的。在樣品含高濃度代謝產物或高活性酶濃度的情況下往往需采用分析儀的小樣品量作為減量參數,從而使儀器的檢測范圍上限得以擴大。總反應容量,在不同的分析儀有一個不同的規定范圍,在設置的時候樣品量和試劑量之和不能超過這一范圍。
該值受儀器的光路系統所影響,直射式光路由于光束較寬,難于減少所測試反應液體積,集束式光路則是通過一個透鏡使光束變窄,可檢測低至μl的反應液混合體,近年來又出現了點光源技術,它的光束更小,照射到樣品杯時僅為一個點,可使反應液的量降至μl。試劑量/樣品量比值,不要為節省試劑而過分地減少試劑用量,因為在終點比色法中,縮小試劑量/樣品量比值會降低線性范圍,遇高濃度樣本會因試劑量不足而使結果偏低。分析時間分析時間包括孵育時間延遲時間監測時間等,選擇不同的分析方法應選擇相應的分析時間。
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